ROTITEST@Vital ist eine kolorimetrische Testlösung zur Bestimmung von Zellproliferation und -vitalität. 1 ml ist dabei ausreichend zur Zählung von 100 Zellproben. Die Lösung ermöglicht bequeme, hoch sensitive Vitalitäts-Assays durch die nicht-radioaktive Zählung proliferierender Zellen. Das Wirkungsprinzip basiert auf dem Tetrazoliumsalz WST-8, welches als Akzeptor für die NADH/NADPH-Dehydrogenase fungiert und dabei zu dem gelb gefärbten Formazan-Farbstoff reduziert wird. Die Menge des Formazan-Farbstoffs, die durch die Aktivität der Dehydrogenasen in proliferierenden Zellen entsteht, ist direkt proportional zur Anzahl lebender Zellen und kann photometrisch gemessen werden. Im Vergleich zu MTT-basierenden Assays ist ROTITEST®Vital 8-fach stabiler und 5-fach sensitiver. Zudem kann das wasserlösliche WST-8 als Ein-Komponenten-System direkt auf die in Nährmedien kultivierten Zellen gegeben werden. Aufgrund der nichtpermeablen Eigenschaften bleiben die Zellen vital und können direkt in down-stream-Assays einsetzt werden. Studien belegen, dass WST-8 auch im Vergleich zu anderen Tetrazoliumsalzen wie XTT und WST-1 die höchste Sensitivität und gleichzeitig geringste Toxizität aufweist.

Die Testlösung wird direkt in 96wells mit kultivierten Zellen zugegeben. Während der Inkubationszeit von einigen Stunden wird von lebenden Zellen ein wasserlöslicher Formazan-Farbstoff (orange) gebildet und in das Zellkulturmedium abgegeben. Die resultierende Farbe wird photometrisch gemessen (ca. 450 nm). Die Testlösung kann auch bei Phenolrot-haltigen Medien verwendet werden.

ROTITEST@Vital ist in Verpackungseinheiten zu 1 ml, 5 ml und 20 ml erhältlich. Es ist nicht toxisch, stabil bei Raumtemperatur und sehr stabil unter Kühlung. Es wird lichtgeschützt gelagert und darf nicht einfrieren.

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